ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)是一种用于生物科研中去除红细胞的专用溶液,主要成分为氯化铵(NH₄Cl)。该裂解液经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其他有核细胞。产品适用于从鼠等哺乳动物组织或血液中裂解并去除无核红细胞,但对鸟或禽类红细胞裂解效果不佳。
氯化铵中的氨根离子(NH₄⁺)不能通过细胞膜,导致渗透压差,使红细胞吸水膨胀而裂解。红细胞为无核细胞,对渗透压变化更为敏感,而淋巴细胞等有核细胞对渗透压具有较强的耐受性。
该裂解液经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞或其他有核细胞。这种选择性裂解特性使其成为细胞分离纯化中的常用试剂。
裂解反应为渗透作用驱动,主要通过物理渗透压差实现,作用方式为膜渗透作用。
ACK红细胞裂解液广泛用于从血液或组织样本中分离纯化和去除红细胞。主要应用场景包括:淋巴细胞分离,即从全血中分离外周血淋巴细胞(PBMC);组织细胞分离,即从富含红细胞的组织(如脾脏、骨髓)中分离有核细胞;原始生殖细胞(PGCs)分离,即从鸡胚胎血液中分离循环性原始生殖细胞。
经ACK红细胞裂解液处理后的样品可用于多种后续实验,包括:细胞培养,即去除红细胞后进行细胞培养;细胞融合,即用于细胞融合实验的细胞制备;核酸提取,即用于RNA和DNA的提取;蛋白提取,即用于蛋白质分析和检测;免疫学分析,如Treg细胞的功能分析。
ACK红细胞裂解液在多项实验研究中展现出良好的应用效果。在细胞分离与分析方面,2025年一项研究显示,使用ACK裂解液处理外周血PBMC后,与未处理对照组相比,ACK处理组的干扰素γ(IFN-γ)产生细胞数量显著增加(p=0.0078),表明ACK处理可能提高记忆T细胞的抗原敏感性。在原始生殖细胞分离方面,在KUB鸡胚胎14-18天发育阶段的研究中,使用ACK裂解液从胚胎血液中分离循环性原始生殖细胞,结果显示第15天胚胎的PGCs产量最高(53.5个/胚胎),该阶段被认为是通过血液循环分离和收集PGCs的推荐时间点。这些研究结果表明,ACK红细胞裂解液在细胞分离纯化及后续功能分析中具有稳定的应用价值。
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