[Perfemiker] 鼠尾胶原蛋白I型，无菌溶液，溶解于0.006mol/L HAc

产品别名：Collagen, Type I (5mg/ml), from rat tail
产品型号：C20-200110
产品包装：10mg/2ml
产品品牌：Perfemiker

产品描述：溶解于 0.006mol/L HAc，无菌溶液。

运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存，有效期1年。不可冻存。

产品介绍：

       胶原蛋白（Collagen）是结缔组织和内脏器官外基质的主要成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布*为广泛。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型，I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构，被广泛用于多种细胞的培养基质，如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外，I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织形态的发生等方面也具有重要应用。

       上海创赛科技的鼠尾胶原蛋白I型 (rat tailtendon collagen type I) 是通过Birkedal-Hansen 的方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备的。鼠尾胶原蛋白可用于包被细胞培养器皿 ，培养一些在普通细胞、培养器皿中不易贴壁的细胞。 也可用于制备三维胶 ，模拟真实的生长环境 ，使细胞在三维环境中生长 。

Perfemiker鼠尾胶原蛋白包被的
培养皿中生长的 PC-12 细胞

Perfemiker鼠尾胶原蛋白三维胶中
生长的 NIH-3T3 细胞（接种后 5天）

和 某S品牌 鼠尾胶原蛋白(cat# C7661)
SDS-PAGE 电泳对比。
A: S品牌 B：Perfemiker

使用方法

1、细胞培养器皿的表面包被 推荐浓度： 1-5ug/cm2

以包被浓度为 2 ug/cm2 为例：

用无菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/ml。按表 (一)体积加到相应的培养器皿中：

确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面，开盖在超净台上过夜晾干。 也可以在室温放置 1小时后，用PBS洗3-4次后直接使用。

包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3个月以上的时间。

2、三维胶原的制备

Perfemiker鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。生友胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。

需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水

A．不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul shengyou鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10xPBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。

B．含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul Perfemiker鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10xPBS或10x培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。

使用注意事项：

鼠尾胶原蛋白I型在室温下pH中性时可迅速成胶 ,在操作过程中要尽量保持低温 。