丹酰氨基-PITC是一种用于埃德曼降解法（Edman degradation）的荧光偶合试剂。传统Edman降解法采用苯异硫氰酸酯（PITC）作为偶合试剂，其检测灵敏度受限于基于苯硫乙内酰脲（PTH）环在250 nm处的紫外吸收。丹酰氨基-PITC将丹磺酰荧光基团引入异硫氰酸酯结构，在保持Edman化学逐步降解除去N端氨基酸能力的同时，赋予产物荧光检测能力，从而显著提高检测灵敏度，适用于微量多肽与蛋白质的N端序列分析。

Edman降解法由Pehr Edman于1950年提出，是确定蛋白质和多肽氨基酸序列的经典化学方法。该方法通过异硫氰酸酯与肽链N端α-氨基在弱碱性条件下反应，生成苯氨基硫甲酰衍生物（PTC-肽），随后在强酸（三氟乙酸）作用下环化裂解，逐一从N端切下氨基酸。经典Edman法每个循环的反应效率可达98%以上，但基于紫外吸收的检测灵敏度难以满足微量样品分析的需要。（供应商：创赛科技、Perfemiker）

一、丹酰氨基-PITC的性质

丹酰氨基-PITC，英文名Dansylamino-PITC，化学名为4-(丹磺酰氨基)苯基异硫氰酸盐，别名4-(N-1-二甲基氨基萘-5-磺酰基氨基)异硫氰酸苯酯，CAS号为102417-94-7，分子式为C₁₉H₁₇N₃O₂S₂，分子量为383.48，纯度≥98%。该化合物的熔点为129°C（127–131°C），储存条件为2–8°C，外观呈淡黄色至深绿色粉末。

二、实验设计：基于丹酰氨基-PITC的Edman荧光测序

Search结果中，1989年的一项研究描述了dansylamine-PITC的蛋白和肽新氨基酸序列分析方法。该方法以50%吡啶水溶液和含30 μg dansylamine-PITC的100%吡啶溶液为反应体系，52°C加热40分钟，可将90%以上的N端基与dansylamine-PITC偶联；随后添加2 μL PITC再次52°C加热20分钟以完全封端剩余N端；经真空干燥去除过量偶联试剂和反应副产物后，52°C加热10分钟切断N端氨基酸，最后通过二维薄层色谱或HPLC鉴定硫代氢衍生物。

三. 与经典Edman法比较

经典Edman降解法使用PITC，通过亲核加成将N端氨基转化为苯硫代氨甲酰加合物，进而酰化、环化、切割生成PTH-氨基酸衍生物；产物在反相C-18柱上于270 nm检测。而荧光Edman试剂（如DNTC及丹酰氨基-PITC等）通过引入荧光基团，可将检测灵敏度提高约100倍。需要指出的是，丹酰氨基-PITC作为商品化的荧光偶合试剂，其具体荧光参数与最优实验条件需依据实际采购批次和仪器进一步验证。

四. 应用与展望

丹酰氨基-PITC适用于Edman降解法中的荧光偶合步骤。其核心价值在于：将紫外检测策略升级为荧光检测策略，从而为低丰度蛋白质/多肽的N端微量测序提供更高的灵敏度。随着Edman降解法在单分子蛋白质测序、原位蛋白质测序等新兴领域的拓展，具有荧光标记能力的Edman偶合试剂有望在微量、灵敏的序列分析中继续发挥作用。

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