Sarkosyl（N-月桂酰肌氨酸钠）是一种温和的阴离子去污剂，CAS号为137-16-6。10% Sarkosyl溶液的经典制备方法为：取10 g N-月桂酰肌氨酸钠溶解于去离子水中，定容至100 ml。在RNA实验中，为保证无RNase污染，制备过程需采取额外的去RNase处理措施。一种文献报道的方法为：在10g Sarkosyl溶于dH₂O并定容至100 ml后，加入0.2 ml焦碳酸二乙酯（DEPC），搅拌约2小时，再进行高压灭菌处理。此外，在含Sarkosyl的缓冲液配制中，应使用DNase-和RNase-free水。该类产品被加入裂解液中，用于抑制RNA提取过程中RNase对RNA的降解。

一、Sarkosyl在RNA提取中的作用机制

1.1 作为去污剂溶解细胞并抑制RNase

RNA提取的核心挑战在于RNase的普遍存在与稳定性。异硫氰酸胍（GTC）是最有效的蛋白质变性剂之一，作为强效RNase抑制剂被广泛应用于RNA提取。Sarkosyl在其中发挥协同作用：作为阴离子去污剂，它能够溶解细胞膜和核膜，促进蛋白质变性，与异硫氰酸胍共同作用以完全变性样本中存在的任何核糖核酸酶。

1.2 在AGPC单步法中的核心地位

Chomczynski与Sacchi于1987年建立的酸异硫氰酸胍-酚-氯仿（AGPC）单步法，已成为RNA提取的经典方法。该方法的核心试剂为变性溶液（溶液D），其组成为：4 M异硫氰酸胍、25 mM柠檬酸钠（pH 7.0）、0.5%（w/v）N-月桂酰肌氨酸（Sarkosyl）以及0.1 M 2-巯基乙醇。

在该方法的实际配制中，10% Sarkosyl溶液被用作储备液。具体配法为：将250 g异硫氰酸胍与293 ml水、17.6 ml 0.75 M柠檬酸钠（pH 7.0）以及26.4 ml 10% Sarkosyl在65 ℃下溶解，制成储备液。该储备液在室温下可保存至少3个月。在使用时，每50 ml储备液加入0.36 ml 2-巯基乙醇，即得到工作用变性溶液D。

1.3 溶液D的准备（无RNase的Sarkosyl溶液, 10%溶液）

该单步法可在4小时内完成RNA分离，产率和纯度良好，特别适用于大量样本处理以及微量细胞或组织样本的RNA提取。在酸性条件下，总RNA保留在上层水相中，而大部分DNA和蛋白质保留在界面或下层有机相中；随后通过异丙醇沉淀回收总RNA。

二、Sarkosyl在其他RNA/DNA研究中的应用

2.1 在RNA病毒研究中的应用

早在1975年，Leis等人即在Rous肉瘤病毒的研究中使用了10% Sarkosyl：将0.01 ml 10% Sarkosyl加入10×SSC处理的冷却溶液中并稀释至4 ml，随后进行Cs₂SO₄梯度离心以分离RNA-DNA共价杂交体。

2.2 在细菌基因表达研究中的应用

Robbins等人（1987）在化脓性链球菌M蛋白基因调控研究中，将原生质体悬浮于含0.05% Sarkosyl的4 M异硫氰酸胍溶液中（含0.1 M β-巯基乙醇和25 mM柠檬酸钠），以实现RNA的裂解与保护。

2.3 在染色质研究中的应用

在DNA双链断裂修复与染色质三维结构研究中，透析缓冲液含0.2% Sarkosyl，其配制采用EDTA、Tris-HCl（pH 8.1）和20% Sarkosyl储备液，并使用DNase-和RNase-free水定容。

2.4 在蛋白质溶解与纯化中的应用

值得注意的是，无RNase Sarkosyl溶液在蛋白质研究中同样具有重要作用。文献报道，10% Sarkosyl可提取超过95%的包涵体蛋白；相比SDS，Sarkosyl是更温和的去污剂，能保持蛋白质的天然折叠状态。其应用场景包括His₆标签蛋白的Ni²⁺树脂纯化、GST标签蛋白纯化（需结合Triton X-100和CHAPS）、膜蛋白提取及后续分析等。

三、与其他去污剂的比较

与SDS（十二烷基硫酸钠）相比，Sarkosyl作为一种更温和的去污剂，在蛋白质变性方面作用较为温和，有利于保持目标蛋白质的活性。在RNA提取中，Sarkosyl与SDS均可用作去污剂组分，例如10%无RNase的SDS溶液也被报道作为Northern blot和Southern blot杂交及洗涤缓冲液的组分，可用于SDS-PAGE、细菌碱裂解等实验。

无RNase的10% Sarkosyl溶液是现代分子生物学实验中不可或缺的试剂。作为异硫氰酸胍-酚-氯仿单步法裂解液（溶液D）的关键组分，它与异硫氰酸胍协同作用，通过强变性效应抑制RNase活性并促进细胞裂解，从而实现完整、未降解RNA的高产量提取。其应用范围已从经典的RNA提取扩展到染色质结构研究、病毒RNA研究以及蛋白质溶解与纯化等多个领域。

随着RNA相关研究（如转录组学、表观遗传学）的持续深入，对无RNase级试剂的需求将不断提升。商品化的即用型10%无RNase Sarkosyl溶液以其便捷性和质量稳定性，正逐步成为实验室标准化配置的选择。

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