RNAwait(非冻型组织RNA保存液)是一种用于高效保存细胞和组织内RNA的试剂。该产品能使细胞内的RNA与RNase(核糖核酸酶)分离,快速可靠地保存新鲜动物组织和细胞内的RNA。RNAwait的别名包括RNAlater稳定液、组织RNA保存液、非冻型组织RNA保存液。
RNAwait通过多重协同机制实现RNA的稳定保存:作为一种液态无毒的组织RNA保存试剂,其首要优势在于能够快速渗入组织内部,迅速抵达组织深处;一旦进入组织,RNAwait能立即抑制其中的RNA酶(RNase)活性,从而有效防止RNA被降解;同时,它能够使细胞内的RNA与RNase分离,确保RNA的完整性得以保持;此外,RNAwait进入细胞的速度非常快,基因表达在发生应急改变前就被锁定,这使得后续的RNA分析更能反映取样时的真实情况。通过这一系列作用机制,RNAwait实现了对组织内RNA的高效稳定保存。
RNAwait适用于多种生物样品的保存,涵盖动物组织、细胞样品及部分植物材料。在动物组织方面,该产品可用于肝脏、脑、肺、脾脏、肾脏、肌肉组织等多种组织类型,能够保持这些组织的RNA完整性。在细胞样品方面,RNAwait能够适用于动物细胞、酵母、细菌及真菌等多种细胞类型的保存。对于植物样品,RNAwait也可以用于部分植物材料的保存,但需要注意的是,对于植物材料的效果需要进行预实验确认,以确保保存效果达到预期。
RNAwait在多个科研领域都有广泛的应用,主要包括基因表达谱分析、转录组研究以及microRNA分析等基础研究方向。同时,该产品也是高通量测序样本保存的优选试剂,能够为各类测序研究提供可靠的RNA样本支持。此外,RNAwait特别适用于野外采样或大批量样品采集的场景,其无需液氮保存、便于运输的特性,使得研究人员能够在各种环境下完成样品的采集与保存,大大拓展了科研工作的灵活性与便利性。
RNAwait实验应用案例如下:
在一项关于乙二醛诱导的高草酸尿症大鼠肾脏组织microRNA表达谱分析的研究中,研究人员采用了RNAwait来保存肾脏样本。具体操作流程为:首先将肾脏取出后用无RNase水进行洗涤,然后剥离肾包膜,随后将肾脏放入5倍体积的RNAwait中,在4℃条件下过夜保存。完成此步骤后,样本被转移至-80℃冰箱中长期保存。在后续实验中,研究人员使用miRNeasy Mini试剂盒提取RNA,并通过NanoDrop ND-1000分光光度计测定RNA质量,确保了样本的完整性与可靠性。
在另一项研究应激诱导的可疑与耐受小鼠杏仁核mRNA和microRNA表达谱的研究中,研究人员同样采用了RNAwait保存小脑组织样本。实验时,研究人员快速解剖出杏仁核区域,并将其置于含有RNAwait保存液的预冷无RNase EP管中。保存处理采用4℃渗透过夜的方式,确保RNAwait充分渗入组织内部。完成渗透后,样本被转移至-80℃冰箱保存,随后送交北京基因组研究所进行高通量测序分析。该实验设计有效保证了转录组研究样本的质量。
在研究FOXI2表观遗传调控促进肾透明细胞癌进展的研究中,研究人员采用了RNAwait进行组织样本的保存与运输。具体操作为:将组织切片包装入含有1.5ml RNAwait保存液的冷冻管中,充分混匀后放入冷藏箱。当日即转入-80℃冷冻保存,确保组织RNA在运输过程中得到充分保护。该案例体现了RNAwait在临床样本保存和运输中的便捷性与可靠性,特别适用于需要当日保存并长期储存的科研场景。
RNAwait作为组织RNA稳定保存液,凭借其快速渗入、抑制RNase活性、兼容多种提取方法等特点,已成为科研领域中样品保存的常用试剂。在基因表达分析、转录组研究、microRNA分析等领域具有重要的应用价值。
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