Super Fluor 647 琥珀酰亚胺酯(Super Fluor 647 Succinimidyl Ester,简称 NHS ester)是一种高性能的近红外荧光染料,广泛应用于生物分子标记、荧光成像、流式细胞术等研究领域。该染料作为Alexa Fluor 647的理想替代品,具有更强的荧光强度、更广的pH应用范围和卓越的抗淬灭性能,已成为现代分子生物学实验中的重要工具。
Super Fluor 647 拥有卓越的光学性能,其激发和发射波长范围与Alexa Fluor 647几乎完全一致:最大激发波长位于648-656纳米,最大发射波长为668-672纳米。该染料具有接近0.33的高量子产率,斯托克斯位移约为14-24纳米,同时展现出约270,000 M⁻¹cm⁻¹的优异消光系数。这些出色的光谱特性使Super Fluor 647特别适合远红外荧光成像应用,能够有效避免生物样本的自发荧光干扰,从而获得清晰、高信噪比的荧光信号。
在免疫荧光染色领域,Super Fluor 647标记的抗体发挥着重要作用,可广泛应用于细胞和组织水平的蛋白检测。在细胞免疫荧光中,该染料能够标记特定蛋白,实现细胞内蛋白的精确定位分析;在组织免疫荧光应用中,可分析组织切片中靶标蛋白的表达情况;配合荧光显微镜进行免疫组化实验时,又能实现对蛋白表达的定性和定量分析,为生物医学研究提供可靠的可视化数据。
在流式细胞术方面,Super Fluor 647同样表现出色。其优异的光谱特性使其能够与iFluor 488、iFluor 594等其他荧光染料协同使用,进行多通道检测和多色流式分析。在免疫表型分析中,通过标记CD标记抗体,可以快速、准确地分析细胞表面标志物的表达情况;同时,结合流式细胞仪的细胞分选功能,还可实现对特定细胞群体的精确分选,为细胞生物学研究提供有力工具。
在荧光原位杂交技术中,Super Fluor 647标记的探针能够实现DNA和RNA的高灵敏度检测。该染料可用于基因定位,确定特定基因在染色体上的精确位置;也可用于染色体分析,检测染色体异常如缺失、易位等;此外,在mRNA检测方面,能够分析基因的表达水平和转录情况,为遗传学和分子生物学研究提供重要手段。
在超分辨显微成像技术中,Super Fluor 647展现了独特的优势。由于其出色的光稳定性和抗淬灭性能,该染料特别适合STORM/dSTORM单分子定位显微成像、PALM光活化定位显微成像以及STED受激发射损耗显微成像等高分辨率显微技术,能够突破传统光学显微镜的衍射极限,实现纳米级精度的细胞结构成像。
在生物芯片与微阵列检测中,Super Fluor 647可标记检测抗体用于蛋白质芯片的高通量筛选,或标记探针用于DNA芯片的基因表达分析。同时,结合其他波长的荧光染料进行多路复用检测,能够在一次实验中同时分析多个目标分子,显著提高检测效率,在药物筛选和疾病诊断中具有广泛应用前景。
在蛋白质组学研究方面,Super Fluor 647标记的蛋白样品可用于差异蛋白表达分析和质谱鉴定,帮助研究人员识别不同条件下表达变化的蛋白质。通过标记蛋白进行pull-down或Co-IP实验,可以研究蛋白质之间的相互作用网络;此外,在活细胞内蛋白动态监测中,该染料还能实现蛋白质定位和迁移的实时追踪,为深入理解细胞功能和信号传导机制提供重要信息。
Super Fluor 647 琥珀酰亚胺酯作为一种高性能的近红外荧光标记试剂,凭借其优异的荧光强度、卓越的光稳定性和广泛的pH适应性,已成为分子生物学实验中的重要工具。无论是免疫荧光染色、流式细胞术、荧光原位杂交,还是超分辨显微成像,Super Fluor 647都能提供出色的标记效果和实验数据。
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