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发布日期:2026/3/19 16:55:00

DTT(Dithiothreitol,二硫苏糖醇)是一种常用的还原剂,广泛应用于RNA研究、蛋白质电泳以及DNA/RNA提取等分子生物学实验中。为了避免RNA酶(RNase)对样本的降解,制备RNase-free(无RNase)的DTT溶液至关重要。

在分子生物学实验中,无RNase的1M DTT 溶液是保护核酸及蛋白质结构完整性的关键试剂,主要应用于以下场景:

在RNA提取过程中,1M DTT 常用于制备 10mM 或 100mM 的工作浓度,作为强还原剂,防止RNA在提取过程中的降解;在蛋白质电泳实验中,DTT 能够破坏蛋白质内部的二硫键,确保样品在电泳时保持变性状态,从而分离出蛋白质的亚基;此外,DTT 还能结合金属离子,抑制RNA酶的活性,进一步保护RNA分子不被降解。

在操作时必须使用无RNase的移液器吸头和离心管,避免接触到有RNase污染的表面,以防止交叉污染;由于DTT在溶液中容易被氧化,溶液颜色可能会从无色变为淡黄色,若发现溶液变色,说明还原能力可能下降,需重新配制;尽管DTT的毒性低于巯基乙醇,但仍建议佩戴手套和实验服,避免皮肤直接接触。

无RNase的1M DTT溶液是分子生物学实验中的基础试剂,其制备过程虽然简单,但对无菌和防污染的要求极高。通过严格的操作规程和正确的保存方法,可确保DTT的还原能力,从而有效保护RNA样本的完整性,为下游实验(如RT-PCR、RNA测序)提供可靠的保障。​

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